Главная >> Статьи >> Книги >> Методики по физиолого-биохимическим исследованиям >> Оценка биохимических методов определения углеводного комплекса

Оценка биохимических методов определения углеводного комплекса

Среди большого разнообразия методов определения сахаров, основанных на их физических и химических свойствах, наибольшего внимания заслуживает метод Бертрана и различные видоизменения его. Метод Бертрана основан на способности сахаров в щелочной среде восстанавливать сернокислую окись меди в закись с учетом последней. Макрометод точен, но очень продолжителен и требует много реактивов и посуды, неэкономичен и не может быть применен при массовых анализах.
В нашем Институте с 1963 г. применяется укороченный метод Бертрана с использованием фотоэлектроколориметра (ФЭК-М) для анализа сахаров у .винограда (лоза, листья и ягоды) и плодовых культур, то есть проводится определение сахаров по обесцвечиванию жидкости Феллинга без учета образовавшейся закиси меди. Предложил этот метод в 1962 г. В Л. Вознесенский. Им было установлено, что степень обесцвечивания анализируемого раствора сахаров после его кипячения с жидкостью Феллинга соответствует содержанию. сахаров в данном растворе.
Нами этот метод детально разработан как метод кассового анализа для винограда, а именно:

  1. Проверены показатели белков и других веществ, разрешающих определению сахара (табл.).

Таблица
Влияние применяемых осадителей на точность определения содержания сахара в листьях (сорт Алиготе)

Установлено, что осадительная смесь дает аналогичные результаты со свинцовым осадителем, но процесс осаждения идет значительно легче и быстрее.

  1. Проверен режим экстракции сахаров и установлено, что лучшие результаты для растительных образцов можно получить в термостате при 50 С в течение ночи.
  2. Установлено, что окраска вытяжек не влияет на точность определения сахаров в образце. Специально проведенные опыты показали, что добавление к образцу некоторого количества глюкозы точно определялось данным методом в окрашенной вытяжке.
  3. Построены графики по глюкозе, что дает возможность при постоянной навеске и разведении вычислить таблицы, где по показанию оптической плотности определяется процент сахара.

Определение сахара в сухих растительных образцах винограда. Навеску (листьев 1 г, лозы 1-2 г) берут на торзионных или аналитических весах и помешают в мерную колбу объемом 100 мл, приливают примерно 60 мл воды и колбы для экстракции сахаров ставят на ночь в термостат при температуре 50 С. Утром колбы вынимают из термостата и в них для осаждения белке® и других редуцирующих веществ, мешающих определению сахаров, прибавляют осадительную смесь (10-процентная желтая кровяная соль — раствор N° 1 и 15-процентный сернокислый цинк - раствор Ms 2 берут в равных количествах). Чаще всего для листьев при навеске в 1 г и для лозы при навеске в 2г. Достаточно прибавить по 1,5 мл растворов № 1 и № 2, то есть в сумме 3 мл. Осаждение проводят осторожно. Сначала прибавляют по 1 мл растворов № 1 и № 2, если осаждение неполное (раствор мутный), прибавляют х). Если навеска лозы 1 г, осадителей берут по0,7мп, то есть в сумме 1,4 мл.

Среде по 0,5 мл растворов № 1 и № 2. Затем содержимое колбы дистиллированной водой доводят до метки, хорошо перемешивают, отстаивают и фильтруют через складчатый фильтр. В фильтрате определяют моносахара и сахара после инверсии, то есть полисахариды первого порядка.
Так как количество сахара определяют по уменьшению интенсивности окраски раствора Феллинга, то необходимо соблюдать следующие условия:

  1. Точно отмерять количество феллинговой жидкости микробюреткой.
  2. Количество раствора и взятой феллинговой жидкости должно быть строго постоянным. В наших условиях мы брали феллинговой жидкости 3 мл и 6 мл испытуемого раствора в сумме 9 мл, при этих условиях составлена калибровочная кривая сахаров на ФЭК-М с применением кювет шириною 10 мм при красном светофильтре.

Определение сахаров до инверсии (моносахара). В три центрифужные пробирки набирают пипеткой или дозатором по 6 мл фильтрата. В опытные пробирки из микробюретки сразу приливают по 3 мл феллинговой жидкости, пробирки встряхивают и ставят в круглый штатив, который помещают в кипящую баню ка 10 минут (считая с момента закипания). Как только пробирки поместили в баню, воду быстро доводят до кипения (кипятят на газовой плите), после чего огонь уменьшают. Если баня с пробирками не сразу закипела, данные анализа будут недостоверны, так как в основе метода Бертрана лежит точное время, когда в теплом состоянии раствор и феллинг находятся в контакте. После 10-мииутного кипячения круглый штатив с пробирками вынимают из кипящей водяной бани и помещают в  сосуд с проточной холодной водой. Охлаждение должно быть быстрым, от. этого зависит точность метода. Далее пробирки центрифугируют (при 3-4 тысячах оборотов в минуту) в течение 10—15 минут, после чего ставят в штатив (колодку), где находятся пробирки с контролем. К контрольным пробиркам с 6 мл фильтрата в каждой приливают по 3 мл феллинга и перемешивают. Образцы готовы к колориметрированию.

Колориметрирование проводят на ФЭК-М при красном светофильтре, используя кювету на 10 мм. Отсчет ведут по левому бара балу по красным делениям шкалы (оптическая плотность). Кюветы с контрольными и опытными растворами помещают в правый канал, причем левый канал все время остается свободным. Делают это следующим образом: в кювету на 10 мм помещают раствор контроля и ставят ее в правый кюветодержатель. При красном светофильтре ставят на нуль левый барабан и вращением оптических клиньев приводят к нулю гальванометр (контроль поставлен на нуль по барабану и по гальванометру). Затем в кювету на 10 мм наливают опытный раствор, осторожно сливают его с осадка закиси меди и ставят снова в правый кюветодержатель (левый канал свободен). Вращают барабан до установления в гальванометре стрелки на нуль и делают отсчет по левому барабану. Затем повторяют это и со второй опытной пробиркой.
Отсчет по красным делениям левого барабана соответствует проценту сахара в анализируемом образце, рассчитанному в таблице на определенную навеску и разведение.
Пример: а) 1 г навески в 100 мл общего объема,
6 мл взято на определение сахара. Показания левого барабана — 0,162, что по таблице соответствует 3,62% сахара;
б)     1 г навески в 100 мл общего объема, на определение сахара взято 3 мл и 3 мл воды; в данном случае процент содержания сахара по таблице умножается на два, так как на определение взято в два раза меньше фильтрата, а именно показания левого барабана -

  1. 162. Следовательно,процентное содержание сахара в образце равно 3,62 х 2 = 7.24;  Контроль - фильтрат В мл и 3 мл феллинга, но без кипячения.

в)     2 г навески в 100 мл общего объема, 6 мл взято на определение сахара, так как навеска вдвое больше, то табличные данные процента сахара делятся на два.
Показания левого барабана - 0,162. Процентное содержание сахара в образце равно 3,62:2=1,81.
Сахара после инверсии (моносахара и полисахариды
1-го порядка . В плоскодонную колбочку объемом 100 мл берут 50 мл фильтрата и 2,5 мл 10-процентной хлорной кислоты. Ставят в кипящую водяную баню на 30 минут. Охлаждают и в мерной колбе на 100 мл доводят до метки. Общее разведение (навеска 1 г доведена до объема 100 мл, отсюда взято на инверсию 50. мл, и они доведены до 100 мл; на определение сахара взято 6 мл) в Два раза больше, чем при опрелении моносахаров. Далее все делается так же, как при определении моносахаров.
Определение сахара в виноградных ягодах. Ягоды без семян измельчают в ткане-размельчителе. Берут навеску 25 г. Добавляют примерно 0,5 г мела для нейтрализации свободных кислот и 50-70 мл дистиллированной воды. Проводят часовую экстракцию на водяной бане при 70-80 С. Образец фильтруют в мерную колбу на 250 мл и доводят до метки водой.
В зависимости от степени зрелости ягод для определения сахара с соответствующим осаждением белков берут на разбавление различное количество фильтрата, а именно, если предполагаемое количество сахара~1,5-

  1. %, то фильтрата берут 20 мл, если 9-18% - 10 мл, если 19-34% - 5 мл и осаждают белки и дубильные вещества осадительной смесью, прибавляя по 0,25-0,5 мл желтой кровяной соли и сернокислого цинка, после чего доводят объем в мерной колбе до 200 мл. Раствор фильтруют и на определение сахаров берут по 6 мл фильтрата. Определение сахаров проводят так же, как и в сухих образцах.

Для проведения анализа готовят:

  1. раствор сернокислой меди (40 г CuSO4 . 5Н2О на один литр воды);
  2. раствор сегнетовой соли (200 г CuH4O6KNa .
  3. Н2О и 150 г NaОН на один литр воды).

Непосредственно перед их использованием эти растворы смешивают в равных объемах (жидкость феллинга).
Определение полисаридов 2-го порядка. Из методов по определению данных полисахаридов- наибольшего внимания заслуживают определение крахмала по Починку и колориметрический метод определения пектиновых веществ по Мальцеву В.И.
Определение крахмала по  Починку производят двумя методами - колориметрическим и объемным. Методы основаны на растворении крахмала в 80-пропентном растворе азотнокислого кальция, осаждении крахмала из раствора йодом; послe центрифугирования и промывания осадка его или растворяют в щелочи и определяют колориметрически, или окисляют бихроматом (объемный метод).
Колориметрический метод. Берется навеска материала из расчета содержания крахмала 10-100 мг.

Извлечение и растворение крахмала. 1 г тонко измельченного образца виноградной лозы помещают в фарфоровую ступку, растирают с толченым стеклом и 5 мл 80-процентного азотнокислого кальция 20 минут, переносят в коническую колбу на 100 мл и смывают 25 мл 80-процентного раствора азотнокислого кальция, кипятят 3 минуты, остывший раствор количественно переносят в мерную колбу на 100 мл, доводят до метки и фильтруют.
Осаждение крахмала йодом. В центрифужные пробирки набирают пипеткой 5 мл фильтрата, прибавляют 2 мл 0,5—процентного раствора йода, перемешивают стеклянной палочкой и ставят в холодильник на полчаса. Всю работу с осаждением крахмала и промывкой осадка проводят на холоду (растворы и ротатор от центрифуги охлаждают в холодной камере, опытные пробирки в холодильнике могут быть оставлены и на ночь). Затем центрифугируют при 6000 об/мин.2 часа, если образцы стояли в холодильнике ночь, то - 1- 1,5 часа; прозрачный раствор сливают, а осадок два раза промывают охлажденным 5-процентным раствором азотнокислого кальция с последующим центрифугированием по 10 минут.
Растворение осадка и колориметрирование. В центрифужные пробирки к осадку крахмала прибавляют 5 мл 0,2 % раствора едкого натра, перемешивают и пробирки погружают в кипящую водяную баню на 5 минут. Осадок крахмала растворяется. Раствор переносят в мерную колбу на 100 мл, прибавляют 0,2 мл 0,5-процентного раствора йода (5 г кристаллического йода и 10 г йодистого калия в 1 литре раствора), разбавляют дистиллированной водой, прибавляют 1 м 1г. соляной кислоты, доводят до метки, перемешивают и колориметрируют с красным светофильтром в кювете 5 мл. На нуль гальванометр устанавливают по воде. Опытные образцы помещают в правый канал (в левом-контроль-вода), отсчет производят по правому барабану - красные деления шкалы (оптическая плотность). По показанию оптической плотности находят в таблице (графа 3) процентное содержание крахмала, которое дано на воздушносухую навеску.

Таблица составлена для следующего разведения:
1 г навески доведен до объема 100 мл, на осаждение взято 5 мл. и объем для колориметрирования - 100 мл.

Очистка крахмала, построение кривой. 1 г крахмала (растворимого) при нагревании растворяют в 50 мл 0,2 н.едкого натра, охлаждают. Осадок удаляют центрифугированием. Объем прозрачного раствора замеряют. Добавляют двойное количество этилового спирта. Крахмал выпадает в осадок, ему дают отстояться. Прозрачный раствор сливают. Осадок декантацией 2-3 раза промывают спиртом при центрифугировании. Затем переносят в бюкс и сушат сначала на воздухе, а затем в термостате 2-3 часа при температуре 95 и не выше 100 С.

Объемный метод. Навеску исследуемого вещества берут из расчета содержания крахмала 20-200 мг. Извлечение, растворение и осаждение крахмала проводят так же, как при колориметрическом методе.
Окисление осадка крахмала бихроматом. К промытому осадку в центрифужных пробирках прибавляют 5            мл 0,25 н. раствора бихромата, приготовленного на серной кислоте, перемешивают стеклянной палочкой, затем палочку смывают в пробирку 2 мл воды. Пробирки ставят в кипящую водяную баню на 15 минут. Крахмал окисляется до углекислоты и воды.
Сняв с кипящей бани, пробирки охлаждают и содержимое их количественно переносят 120 мл воды в конические колбы на 250 мл, затем прибавляют 5 мл 20-процентного раствора йодистого калия. Йодистый калий реагирует с избытком бихромата,и выделяется йод, который оттитровывают 0.1 н. гипосульфитом. Контролем служит количество 0,1 н. раствора гипосульфита, пошедшего на титрование 5 мл бихромата калия (приготовленного на 85-процентной серной кислоте), разбавленного 120 мл воды и 5 мл 20% К J. 1 мл 0,1 н. раствора гипосульфита соответствует 0,675 мг крахмала. Контроль минус опыт соответствует количеству бихромата калия, пошедшего на окисление крахмала.

Расчет проводят по формуле:
% крахмала где,
объем, взятый для осаждения крахмала;
V - объем, в котором растворена навеска;
Р - навеска вещества;
N - коэффициент нормальности гипосульфита;
К - количество гипосульфита, пошедшего на контроль;
ОН - количество гипосульфита, пошедшего на опыт.
Сравнение методов определения крахмала по Починку с анастатическим приводится в таблице 2.
Таблица 2
Результаты анализа лозы сорта Алиготе (% крахмала, данные на сухой вес)

Как видно из таблицы 2, оба метода являются достаточно точными-. Однако колориметрический метод значительно меньше отнимает времени и более удобен в работе. Вычисленные таблицы дают возможность по показанию барабана сразу находить процент крахмала. При колориметрическом методе нет необходимости определять титр гипосульфита, который, как известно, нестоек и требует частой проверки, что значительно усложняет объемный метод и не дает возможности составить таблицы для вычисления процента крахмала по объемному методу.
Реактивы

  1. 80-процентный раствор азотнокислого кальция (800 г Са (N03)2 • 4 Н2О + 200 мл воды). Растворение при 45-50°С. В анализ идет охлажденный раствор.
  2. 5-процентный раствор азотнокислого кальция.

 Набирают 12,5 мл 80-процентного раствора азотнокислого кальция в мерный цилиндр, разбавляют до 200 мл  и прибавляют 2 мл 0,5-процентного  раствора йода.
Этот раствор готовят на один день работы.

  1. 0,5-процентный раствор йода. Отвешивают с точностью до 0,01 г 10 г Кйод и 5г йода, высыпают в ступку и растирают сначала сухую смесь, затем с 10 мл воды переносят в литровую колбу, растворяют и доводят до метки водой.
  2. 0,2 н. раствор едкого натра. 8 г едкого натра растворяют в воде и доводят объем до одного литра.
  3. 2 н. соляная кислота.
  4. 0,25 н. раствор бихромата калия. Отвешивают с точностью до 0,01 г 12,3 г г , растворяют в 250 мл дистиллированной воды в двухлитровой колбе и постепенно при охлаждении приливают 800 мл концентрированной серной кислоты, хорошо перемешивают и после охлаждения переливают в склянку с притертой пробкой.

Определение сахаров по Бертрану по обесцвечиванию жидкости Феллинга
фЭК-М, кювета 10. Красный светофильтр. Анализ растений. Определение редуцирующих сахаров при разведении 1 г - 100 мл - 6 мг»; 6 мл раствора и 3 мл феллинга; сахара после инверсии при разведении: 1 г - 100 мл - 50 мл - 100 мл - 6 мл; 6 мл раствора и 1мл феллинга.

Процент сахаров вычислен на абсолютно сухой вес, влажность воздушносухих образцов принята за 5%.

1

2

3

4

5

6

.7

8

0,130

1,748

3,06

6,12

0,153

1,978

3,46

6,92

0,131

1,758

3,07

6,14

0,154

1,988

3,48

6,96

0,132

1,768

3,09

6,18

0,155

1,998

3,49

6,98

0,133

1,778

3,11

6,22

0,156

2,008

3,51

7,02

0,134

1,788

3,13

6,26

0,157

2,018

3,53

7,06

0,135

1,798

3,14

6,28

0,158

2,028

3,55

7,10

0,136

1,808

3,16

6,32

0,159

2,038

3,56

7,12

0,137

1,818

3,18

6,36

0,160

2,048

3,58

7,16

0,138

1,828

3,20

6,40

1,161

2,058

3,60

7,20

0,139

1,838

3,21

6,42

 1,62

2,068

3,62

7,24

0,140

1,848

3,23

6,46

0,163

2,078

3,63

7,26

0,141

1,858

3,25

6,50

0,164

2,088

3,65

7,30

0,142

1,868

3,27

6,54

0,165

2,098

3,67

7,34

0,143

1,878

3,28

6,56

0,166

2,108

3,69

7,38

0,144

1,888

3,30

6,60

0,167

2,118

3,70

7,40

0,145

1,898

3,32

6,64

0,168

2,128

3,72

7,44

0,146

1,908

3,34

6,68

0,169

2,138

3,74

7,48

0,147

1,918

3,35

6,70

0,170

2,150

3,76

7,52

0,148

1,928

3,37

6,74

0,171

2,160

3,78

7,'56

0,172

2,170

3,79

7,s8

0,196

2,411

4,22

8,44

0,173

2,180

3,81

7,62

0,197

2,421

4,23

8,46

0,174

2,190

3,83

7,66

0,198

2,431

4,25

8,50

0,175

2,200

3,85

7,70

0,199 I

2,441 ‘

4,27

8,54

1

2

3

4

5

6

7

8

0,176

2,210

3,86

7,72

0,200

2,452

4,29

8,58

0,177

2,220

3,88

7,76

0,201

2,462

4,31

8,62

0,178

2,230

3,90

7,80

0,202

2,472

4,32

8,62

0,179

2,240

3,92

7,84

0,203

2,482

4,34

8,68

0.18С

2,250

3,93

7,86

0,204

2,492

4,36

8,72

0,181

2,260

3,95

7,90

0,205

2,502

4,38

8,76

0,182

2,270

3,97

7,94

0,206

2,512

4,39

8,78

0,183

2,280

3,99

7,98

0,207

2,522

4,41

8,42

0,184

2,290

4,00

8,00

0,208

2,532

4/43

8,86

0,185

2,300

4,02

8,04

0,209

2,542

4,45

8,90

0,186

2,310

4,04

8,08

0,210

2,552

4,46

8,92

0,187

2,320

4,06

8,12

0,211

2,563

4,48

8,96

0,188

2,330

4,08

8,16

0,212

2,573

4,50

9,00

0,189

2,340

4,09

8,18

0,213

2,583

4,52

9,04

0,190

2,350

4,11

8,22

0,214

2,593

4,53

9,06

0,191

2,361

4,13

8,26

0,215

2,604

4,55

9,10

0,192

2,371

4,15

8,30

0,216

2,614

4,57

9,14

0,193

2,381

4,16

8,32

0,217

2,624

4,59

9,18

0,194

2,391

4,18

8,36

0,218

2,634

4,61

9,22

0,195

2,401

4,20

8,40

0,219

2,644

4,62

9,24

 

 

 

 

0,244

2,900

5,07

10,14

0,220

2,655

4,64

9,28

0,245

2,918

5,10

10,20

0,221

2,665

4,66

9,32

0,246

2,930

5,12

10,24

1

2

3

4

5

6

7

8

0,222

2,675

4,68

9,36

0,247

2,940

5,14

10,28

0,223

2,685

4,70

9,40

0,248

2,952

5,16

10,32

0,224

2,695

4,71

9,42

0,249

2,970

5,19

10,38

0,225

2,705

4,73

9,46

 

 

 

 

0,226

2,715

4,75

9,50

0,250

2,980

5,21

10,42

0,227

2,725

4,77

9,54

0,251

2,998

5,24

10,48

0,228

2,735

4,78

9,58

0,252

3,002

5,25

10,50

0,229

2,745

4,80

9,60

0,253

3,020

5,28

10,56

0,230

2,755

4,82

9,64

0,254

3,032

5,30

10,60

0,231

2,765

4,84

9,68

0,255

3,048

5,33

10,66

0,232

2,775

4,85

9,70

0,256

3,055

5,34

10,68

0,233

2,785

4,87

9,74

0,257

3,070

5,37

10,74

0,234

2,795

4,89

9,78

0,258

3,082

5,39

10,78

0,235

2,805

4,91

9,82

0,259

3,095

5,41

10,82

0,236

2,815

4,92

9,84

0,260

3,105

5,43

10,86

0,237

2,825

4,94

9,88

0,261

3,120

5,46

10,92

0,238

2,835

4,96

9,92

0,262

3,135

5,48

10,96

0,239

2,845

4,98

9,96

0,263

3,145

5,50

11,00

0,240

2,858

5,00

10,00

0,264

3,160

5,53

11,06

0,241

2,870

5,02

10,04

0,265

3,170

5,54

11,08

0,242

2,880

5,04

10,08

0,266

3,185

5,57

11,14

0,243

2,890

5,05

10,10

0,267

3,200

5,60

11,20

0,268

3,212

5,62

11,24

0,292

3,512

6,14

12,28

1

 2

3

4

5

6

 7

8

0,269

3,225

5,64

11,28

0,293

3,525

6,16

 

12,36

0,270

3,238

5,66

11,32

0,294

3,540

6,19

12,38

0,271

3,250

5,68

11,36

0,295

3,550

6,21

12,42

0,272

3,262

5,70

11,40

0,296

3,562

6,23

12,46

0, 273

3,275

5,73

11,46

0,297

3,575

6,25

12,50

0, 274

3,288

5,75

11,50

0,298

3,590

6,38

12,56

0,275

3,300

5,77

11,54

0,299

3,600

6,30

12,60

0,276

3,312

5,79

11,58

0,300

3,612

6,32

12,64

0,277

3,325

5,81

11,62

0,301

3,62б

6,34

12,68

0,278

3,340

5,84

11,68

0,302

3,640

6,37

12,74

0,279

3,350

5,86

11,72

0,303

3,652

6,39

12,78

0,280

3,360

5,88

11,76

0,304

3,665

8,41

12,82

0,281

3,375

5,90

11,80

0,305

3,680

6,44

12,88

0,282

3,388

5,93

11,86

0,306

3,690

6,45

12,90

0,283

3,400

5,95

11,90

0,307

3,702

6,47

12,94

0,284

3,412

5,97

11,94

0,308

3,712

6,49

12,98

0,285

3,425

5,99

11,98

0,309

3,728

6,52

13,04

0,286

3,440

6,02

12,04

0,310

3,740

6,54

13,08

0,287

3,450

6,03

12,06

0,311

3,752

6,56

13,12

0,288

3,462

6,05

12,10

0,312

3,768

6,59

13,18

0,289

3,475

6,08

12,16

0,313

3,780

6,61

13,22

0,290

3,488

6,10

12,20

0,314

3,792

6,63

13,26

0,291

3,500

6,12

12,24

0,315

3,802

6,65

13,30

1

2

3

4

5

6

7

8

0,316

3,818

6,68

13,36

0,339

4,110

7,19

14,38

0,317

3,830

6,70

13,40

0,340

4,125

7,21

14,42

0,318

3,845

6,72

13,42

0,341

4,138

7,24

14,48

0,319

3,855

6,74

13,48

0,342

4,148

7,25

14,50

0,320

3,870

6,77

13,54

0,343

4,160

7,28

14,56

0,321

3,880

6,79

13,58

0,344

4,175

7,30

14,60

0,322

3,890

6,80

13,60

0,345

4,185

7,32

14,64

0,323

3,908

6,83

13,66

0,346

4,198

7,34

14,68

0,324

3,920

6,86

13,72

0,347

4,210

7,36

14,72

0,325

3,935

6,88

13,76

0,348

4,225

7,39

14,78

0,326

3,945

6,90

13,80

0,349

4,238

7,41

14,82

0,327

3,958

6,92

13,84

0,350

4,250

7,43

14,86

0,328

3,970

6,94

13,88

0,351

4,260

7,45

14,90

0,329

3,982

6,96

13,92

0,352

4,270

7,46

14,92

0,330

3,995

6,99

13,98

0,353

4,285

7,49

14,98

0,331

4,010

7,01

14,02

0,354

4,298

7,52

15,04

0,332

4,020

7,03

14,06

0,355

4,320

7,56

15,12

0,333

4,032

7,05

14,10

0,356

4,335

7,58

15,16

0,334

4,045

7,07

14,14

0,357

4,348

7,60

15,20

0,335

4,060.

7,10

14,20

0,358

4,360

7,63

15,26

0,336

4,070

7,12

14,24

0,359

4,372

7,65

15,30

0,337

4,085

7,14

14,28

0,360

4,385

7,67

15,34

0,338

4,100

7,17

14,34

0,361

4,392

7,68

15,36

1

2

 3

4

 5

8

 

8

0,382

4,400

7,69

15,38

0,386

4,705

8,23

18,46

0,383

4,415

7,72

15,44

0,387

4,718

8,25

16,50

0,364

4,425

7,74

15,48

0,388

4,730

8,27

16,54

0,365

4,440

7,77

15,54

0,389

4,740

8,29

J 6,58

0,366

4,450

7,78

15,56

0,390

4,755

8,32

16,64

0,367

4,462

7,80

15,60

0,391

4,770

8,34

16,88

0,368

4,480

7,84

15,68

0,392

4,782

8,36

16,72

0,369

4,490

7,85

15,70

0,393

4,795

8,39

16,78

0,370

4,500

787

15,74

0,394

4,805

8,40

16,80

0,371

4,512

7,89

15,78

0,395

4,820

8,43

16,86

0,372

4,525

7,91

15,82

0,396

4,835

8,46

16,92

0,373

4,540

7,94

15,88

0,397

4,848

8,48

16,96

0,374

4,552

7,96

15,92

0,398

4,860

8,50

17,00

0,375

4,565

7,98

15,96

0,399

4,875

8,53

17,06

0,376

4,580

8,01

16,02

0,400

4,888

8,55

17,10

0,377

4,590

8,03

16,06

0,401

4,898

8,57

17,14

0,378

4,600

8,04

16,08

0,402

4,910

8,59

17,18

0,379

4,612

8,07

16,14

0,403

4,922

8,61

17,22

0,380

4,625

8,09

16,18

0,404

4,935

8,63

17,26

0,381

4,635

8,11

16,22

0,405

4,950

8,66

17,32

0,382

4,652

8,14

16*28

0,406

4,962

8,88

17,36

0,383

4,865

8,16

16,32

0,407

4,975

8,70

17,40

0,384

4,680

8,18

18,38

0,408

4,988

8,72

17,44

1

2

3

4

5

6

7

8

0,383

4,690

8,20

16,40

0,409

5,00

8,74

17,48

0,410

5,010

8,76

17,52

0,434

5,322

9,31

18,62

0,411

5,025

8,79

17,58

0,435

5,340

8,34

18,68

0,412

5,045

8,82

17,84

0,436

5,35

9,37

18,74

0,413

5,052

8,84

17,68

0,437

5,365

9,38

18,76

0,414

5,065

8,89

17,72

0,438

5,378

9,41

18,82

0,415

5,080

8,88

17,76

0,439

5,390

9,43

18,86

0,416

5,092

8,91

17,82

0,440

5,402

9,45

18,90

0,417

5,105

8,93

17,86

0,441

5,415

9,47

18,94

0,418

5,115

8,65

17,90

0,442

5,428

9,49

18,98

0,419

5,128

8,97

17,94

0,443

5,440

9,51

19.02

0,420

' 5,140

8,99

17,98

0,444

5,450

9,53

19,06

0,421

5,155

9,02

18,04

0,445

5,462

9,55

19,10

0,422

5,170

9,04

18,08

0,446

5,475

9,58

19,16

0,423

5,180

9,06

18,12

0,447

5,490

9,60

19,20

0,424

5,192

9,08

18,16

0,448

5,500

9,62

19,24

0,425

5,202

9,10

18,20

0,449

5,515

9,65

19,30

0,426

5,220

9,13

18,26

0,450

5,528

9,67

19,34

0,427

5,232

9,15

18,30

0,451

5,540

9,69

19,38

0,428

5,245

9,17

18,34

0,452

5,552

9,71

19,42

0,429

5,258

9,20

18,40

0,453

5,565

6,73

19,46

0,430

5,275

9,23

18/16

0,454

5,580

9,76

19,52

0,431

5,288

9,25

18,50

0,455

5,592

9,78

19,56

1

 2

3   

4

5

6

7

8

0 ,4 32

5,300

9,27

18,54

0,456

5,605

9,80

19,60

0,433

5,310

9,29

18,58

0,457

5,620

9,83

19,66

0,458

5,630

9,85

19,70

0,482

5,940

10,39

20,78

0,459

5,648

9,83

19,76

0,483

5,950

10,41

20,82

0,460

5,853

9,90

19,80

0,484

5,962

10,43

20,86

0,461

5,670

9,92

19,84

0,485

5,975

10,45

20,90

0,462

5,680

9,93

19,86

0,486

5,990

10,48

20,96

0,463

5,695

9,96

19,92

0,487

6,002

10,50

21,00

0,464

5,708

9,98

19,96

0,488

6,012

10,51

21,02

0,465

5,720

10,00

20,00

0,489

6,028

10,54

21,08

0,466

5,735

10,03

20,06

0,490

6,040

10,56

21,12

0,467

5,748

10,05

20,10

0,491

6,052

10,58

21,16

0,468

5,760

10,07

20,14

0,492

6,070

10,62

21,24

0,469

5,770

10,09

20,18

0,493

6,080

10,63

21,26

0,470

5,782

10,12

20,24

0,494

6,092

10,65

21,30

0,471

5,798

10,14

20,28

0,495

6,101

10,67

21,34

0,472

5,810

10,16

20,32

0,496

6,120

10,70

21,40

0,473

5,822

10,18

20,36

0,497

6,130

10,72

21,44

0,474

5,835

10,20

20,40

0,498

6,142

10,74

21,48

0,475

5,850

10,23

20,46

0,499

6,155

10,76

21,52

0,476

5,860

10,25

20,50

0,500

6,170

10,79

21,58

0,477

5,875

10,27

20,54

0,501

6,180

10,81

21,62

0,478

5,888

10,30

20,60

0,502

6,190

10,83

21,66

1

2

3

4

5

6

7

8

0,479

5,900

10,32

20,64

0,503

6,205

10,85

21,70

0,480

5,912

10,34

20,68

0,504

6,220

10,88

21,76

0,481

5,925

10,36

20,72

0,505

6,230

10,90

21,80

0,508

6,240

10,91

21,82

0,529

8,540

11,44

22,88

0,507

6,255-

10,94

21,88

0,530

6,552

11,48

22,92

0,508

6,270

10,97

21,94

0,531

8,568

11,49

22,98

0,509

8,285

10,99

21,98

0,532

6,580

11,51

23,02

0,510

6,298

11,01

22,02

0,533

6,590

11,53

23,06

0,511

6,305

11,03

22,06

0,534

6,600

11,54

23,08

0,512

6,320

11,05

22,10

0,535

8,612

11,58

23,12

0,513

8,335

11,08

22,16

0,538

6,628

11,59

23,18

0,514

6,348

11,10

22,20

0,537

6,840

11,61

23,22

0,515

8,360

11,12

22,24

0,538

6,655

11,64

23,28

0,516

6,372

11,14

22,28

0,539

6,665

11,86

23,32

0,517

6,388

11,17

2234

0,540

.6,680

11,68

23,36

0,518

6,400

11,19

22,38

0,541

6,690

11,70

23,40

0,519

6,410

11,21

22,42

0,542

8,702

11,72

23,44

0,520

6,425

11,24

22,48

0,543

6,718

11,75

23,50

0,521

6,438

11,26

22,52

0,544

6,730

11,78

23,56

0,522

6,450

11,28

22,56

0,545

6,742

11,79

23,58

0,523

6,462

11,30

22,60

0,546

6,758

11,82

23',64

0,524

6,475

11,32

22,64

0,547

6,770

11,84

23,68

0,525

8,490

11,35

22,70

0,548

8,780

11,88

23,72

I

2

3

4

5

8

7

8

0,526

6,500

11,37

22,74

0,549

6,798

1139

23,78

0,527

6,515

11,39

22,78

0,550

8,805

11,90

23,80

0,528

8,530

11,42

22,84

0,551

8,820

11,93

23,86

0,532

6,830

11,95

23,90

0,559

6,922

12,11

24,22

0,553

6,845

11,97

23,94

0,560

.6,940

12,14

24,28

0,354

6,880

12,00

24,00

0,561

8,948

12,15

24,30

0,553

6,87

12,02

24,04

0,562

6,960

12,17

24,34

0,356

6,888

12,05

24,10

0,563

6,975

12,20

24,40

0,557

6,900

12,07

24,14

0,564

6,990

12,23

24,8

0,558

6,910

12,09

24,18

0,565

7,000

12,24

24,48

 
< Колориметрический метод определения азота   К использованию метода Аблова-Батыра для определения восстанавливающих сахаров >
Искать по сайту:
или внутренним поиском:

Translator

Наверх