Главная >> Статьи >> Остаточные количества добавленных к суслу фунгицидов в 10-дневном вине

Остаточные количества добавленных к суслу фунгицидов в 10-дневном вине

УДК 634.8
ОСТАТОЧНЫЕ КОЛИЧЕСТВА ДОБАВЛЕННЫХ К СУСЛУ ФУНГИЦИДОВ В Ю-ДНЕВНОМ ВИНЕ - ЛАБОРАТОРНЫЕ ОПЫТЫ
Л.С. Катерова
Институт виноградарства и виноделия, г. Плевен, ул. Кала тепе № 1, Болгария; e-mail: katerova lili@abv.bg
Исследованы остаточные количества (OK) добавленных к суслу фунгицидов с активными веществами хлорталонил, фолпет, пропиконазол, пенконазол и миклобутанил в 10-дневном вине, после завершения бурного брожения - спонтанного и направляемого 1 % бродильных винных дрожжей. Во всех винах, полученных спонтанным брожением, ОК, добавленных к суслу, фунгицидов меньше чем в тех, полученных направляющим брожением. Из исследуемых фунгицидов больше уменьшается хлорталонил - до 0,2 и 0,5 %, а наименее фолпет - до 36,7-43,3 и 40,0-46,7 % с первоначально добавленного, соответственно при спонтанном и направляемом брожениях.
Фунгициды - самые применяемые в виноградарстве пестициды. При сборе винограда часто устанавливаются ОК (остаточные количества) хлорталонила [1], а фолпет, пенконазол и миклобутанил среди фунгицидов, чьи О К превышают максимально допустимые для винограда в Италии [2]. Комитетом по пестицидным остаткам в Великобритании установлены в винограде ОК пропиконазола, пенконазола и миклобутанила [3]. Хлорталонил, фолпет и миклобутанил находили и в винах [4].
Остаточные количества фунгицидов в винограде, кроме токсикологических эффектов на здоровье производителей и потребителей, могут оказать неблагоприятное влияние на нормальный ход алкогольного брожения и на качество полученного вина.
Цель исследования - установить ОК добавленных к суслу фунгицидов с активными веществами (а.в.) хлорталонил, фолпет, пропиконазол, пенконазол и миклобутанил в молодых 10-дневных винах, после завершения бурного брожения - спонтанного и направляемого.
Материалы. Фунгицидные продукты: Хлорталонил 500 СЦ (Chelm) и Браво 500 (ISK Biotech) с а.в. хлорталонил; Фолпан 50 ВП и Фолпан 80 ВДГ (Makhteshim Agan) с а.в. фолпет; Бампер 25 ЕК (Makhteshim Agan) и Тилт 250 ЕК (Ciba) с а.в. пропиконазол; Топаз 100 ЕК (Агрия АД) с а.в. пенконазол; Систан 12 Е (Rohm & Haas) и Систан супер 24 ЕК (Агрия АД) с а.в. миклобутанил.
Винные дрожжи: сухие селекционированные винные дрожжи Saccharomyces cerevisiae Stamm D576 (SIHA-Riesling-Yeast 7, Begerow Germany), активированные согласно указаниям производителя.
Методы для определения ОК: газовой хроматографией с электрон хватающим детектором [5, 6].
Лабораторные опыты для установления ОК а.в. фунгицидов, добавленных в сусло из необработанного винограда, после протекания бурного брожения. В 2001-2003 гг. исследовано влияние добавки фунгицидов на два варианта брожения несульфитированного сусла из сорта Рислинг итальянский:
1. Нестерильное и незаквашенное,
2. Стерилизиранное, заквашенное 1 % бурно брожащих винных дрожжей, отвечающих 6 g/hL сусла неактивированных сухих дрожжей. Количества добавленного фунгицидного продукта (соответствующее ему а.в.) соображены с нормативами для винного винограда и с максимально установленными остаточными количествами в польских пробах винограда во время его сбора [7]. После завершения бурного брожения (10 дней) определены ОК а.в. фунгицидов в прозрачной части молодого вина (3 повторения).
Статистический анализ: t - тест типа 2 (Analysis Toolpak:
Excel).
Во всех винах, полученных спонтанным брожением, ОК а.в. добавленных к суслу фунгицидов меньше чем тех, полученных направляющим брожением (табл. 1 и 2).
Остаточные количества а.в. фунгицидов в 10-дневном вине, полученном спонтанным и направляемым 1 % дрожжей брожениями
Таблица 1


№ Опыта

Добавка

Остаточные количества а.в.

фунгицид

активное вещество

Спонтанное

1 % дрожжей

Название

mg/L

mg/L

%*

mg/L

%*

1

Минорикс 70 ВП

хлорталонил

1,75

0,003 а

0,2

0,009 b

0,5

2

Браво 500

хлорталонил

1,75

0,003 а

0,2

0,009 b

0,5

3

Фолпан 50 ВГ

фолпет

0,30

0,11а

36,7

0,14 b

46,7

4

Фолпан 80 ВДГ

фолпет

0,30

0,13 а

43,3

0,14 a

46,7

5

Фолпан 50 ВГ

фолпет

0,45

0,17 а

37,8

0,18 a

40,0

6

Фолпан 80 ВДГ

фолпет

0,45

0,18 а

40,0

0.20 b

44,4

7

Бампер 25 ЕК

пропиконазол

0,50

0,047 а

9,4

0,066 b

13,2

8

Тилт 250 ЕК

пропиконазол

0,50

0,050 а

10,0

0,068 b

13,6

9

Топаз 100 ЕК

пенконазол

0,50

0,055 а

11,0

0,058 b

11,6

10

Систан 12 Е

миклобутанил

0,20

0,01 а

5,0

0,04 b

20,0

11

Систан супер 24 ЕК

миклобутанил

0,20

0,01 а

5,0

0,03 b

15,0

Замечание: Концентрации в данной строчке (среднее трех определений) обозначены различными буквами и значительно отличаются (Р<0,05) при сравнении с ,,t" - тестом; * - % добавленного а. в.
Таблица 2
Сравнение с ,,t" - тестом ОК в 10-дневном вине, после: а) спонтанного и б) направляемого 1 % дрожжей бурного алкогольного брожения

Брожение

Опыт №:

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

а)спонтанное

0,003

0,003

0,107

0,167

0,127

0,177

0,047

0,050

0,055

0,010

0,010

6) 1% дрожжей

0,009

0,009

0,137

0,177

0,137

0,197

0,066

0,068

0,058

0,035

0,032

Д

-0,006

-0,006

-0,03

-0,01

-0,01

-0,02

-0,018

-0,019

-0,003

-0,025

-0,022

P

0,000

0,000

0,003

0,101

0,101

0,013

0,000

0,000

0,003

0,000

0,000

Самая значительная разница установлена при вариантах с прибавкой продуктов Систан 12 Е и Систан супер 24 ЕК (а.в. миклобутанил), хотя они не влияют на ход брожения [7]. Из исследуемых фунгицидов наиболее уменьшается хлорталонил - до 0,2 и 0,5 %, а наименее фолпет - до 36,7-43,3 и 40,0-46,7 % первоначально добавленного соответственно при спонтанном и направляемом брожениях (табл. 1).
Литературные данные о разложении фолпета в стерильном и нестерильном сусле и в вине противоречивы. Многие авторы [8, 9, 10 и др.] устанавливают почти полное разложение фолпета в сусле до фталимида, объясняя его гидролизом. Кроме того, что гидролизирует- ся, фолпет адсорбируется и биотрансформируется дрожжами [11]. С другой стороны, есть сообщения о наличии довольно высоких ОК фолпета (0,1 - >15 mg/L) в 219 из 1827 исследованных проб из преимущественно импортного виноградного сока, предназначенного для производства вина [4]. Следовательно, сильно сульфитицирован - обычно 0,8-1,5 g S02/L [12]. Наличие этих очень высоких ОК в суль- фитицированном виноградном соке показывает, что причины разложения фолпета - вероятно не только гидролиз и биотрансформация. Серный диоксид своим редукционным действием создает бескислородную среду, мешает дрожжам начать алкогольное брожение. Он действует бактериостатично и бактерицидно, инактивирует некоторые энзимы, но нельзя ожидать, что он остановит гидролиз.
В попытках объяснить это противоречие, в настоящем исследовании, при добавке 0,8 и 1,2 g/L серного диоксида, установилось обратно-пропорциональное концентрации снижение рН сусла от 2,90, до 2,36 и 2,07, что апроксимируется уравнением:
рН = - 0,6893 (концентрация S02) + 2,9029 (R2=0,9997).
Деградация фолпета в стерилизированном фильтрованием виноградном соке значительно ускоряется при повышении рН от 3,2 до 3,8 [9]. Вызванные добавлением серного диоксида низкие стоимости рН (2,36-2,07), ввиду установленной Hatzidimitriou и др. [9] зависимости, предполагают очень медленный гидролиз фолпета, которым можно отчасти объяснить высокие стоимости фолпета в виноградном соке, найдены Soleas и Goldberg [4].
В настоящем исследовании рН сусла тоже довольно низкое пе- ред спонтанным и направляемым брожениями (табл. 3), и может являться причиной более медленного гидролиза фолпета (нормальное рН сусла 2,9-3,5). Другие возможные причины высоких стоимостей ОК фолпета, установленные в 10-дневном вине,- это анализированная мутная (самоосажденная) супернатанта, возможно содержащая фолпет, адсорбированный по дрожжам [13] и стабилизирующее фолпет влияние других элементов добавленных фунгицидов [8]. Вопрос нуждается в дополнительном исследовании.
В поддержке полученных в настоящем исследовании результатов и вышеупомянутого тезиса о влиянии рН, установленные ОК фолпета в двухмесячном вине - 0,003-0, 008 mg/L, в 6 из 6 вин [14], и в вине для купажирования, перешедшее все виды обработки, вкл. очистку - в 5 из 1537 исследованных проб, в 2 из них» превышающие 0,1 mg/L [4].
Таблица 3
Показатели виноградного сусла (контроль) перед брожением


Показатель

Нестерилизованное

Стерилизованное

РН

2,94

2,90

Общие сахары, g/L

161

180

Титруемые кислоты, g/L

8,55

8,40

На 10-й день в молодом вине рН повышается соответственно до 3,06-3,23, и 3,26-3,73 (табл. 4).
Таблица 4
Показатели 10- дневного вина, броженного добавленным фолпетом


Добавка к суслу

Вино из незаквашенного сусла

Вино из стерилизированного сусла+ 1% S. cerevisiaee

фунгицид

а.в., mg/L

С02, %
контроля

сохраненное а.в., %

рН

С02, % контроля

сохраненное а.в., %

рН

Фолпан 50 ВП

0,30

100,4

36,7

3,18

99,1

46,7

3.73

Фолпан 80 ВДГ

0,30

100,5

43,3

3,23

96,3

46,7

3,52

Фолпан 50 ВП

0,45

100,6

37,8

3,06

85,5

40,0

3,28

Фолпан 80 ВДГ

0,45

100,5

40,0

3,07

94,8

44,4

3,26

Причиной более больших концентраций уделенного углеродного диоксида по сравнению с контролем при спонтанном брожении (табл. 4) может быть образование меньше страничных продуктов (больше сахара ферментировало до алкоголя и диоксида углерода) и образование меньше дрожжевых клеток (использовано меньше сахара доя их роста).

Меньшие стоимости ОК при спонтанном брожении можно объяснить отсуствующими в стерилизированном сусле частицами винограда и плохо устойчивыми повышенному алкогольному содержанию дикими дрожжами, которые отстаиваясь, устраняют часть ОК. Подобный эффект имеют некоторые нерастворимые полисахариды, вкл. клеточные мембраны дрожжей, целлюлозу и др., использованные для стимуляции алкогольного брожения в присутствии фунгицидов [15].
В спонтанном брожении участвуют значительные по виду и числу количества нативных дрожжей. Большая часть из них с повышением алкогольного содержания быстро вымирают и устраняют от брожевого сусла накопленные в их клеточных мембранах ОК фунгицидов. Этого эффекта нельзя достичь в той же самой степени селекционированными дрожжами, даже если они чувствительны к соответствующим а.в.
На основе проведенного исследования, можно сделать следующие предварительные выводы:

  1. Во всех винах, полученных спонтанным брожением, ОК а.в. добавленных к суслу фунгицидов меньше, чем в тех, полученных направляемым брожением.
  2. Самая значительная разница между ОК в винах, полученных спонтанным и направляемым брожениями, установлена при вариантах с добавкой Систана 12 Е и Систана супер 24 ЕК (а.в. миклобутанил).
  3. Из исследуемых фунгицидов наибольше уменьшается а.в. хлорталонил - до 0,2 и 0,5 %, а наименее а.в. фолпета - до 36,7-43,3 и 40,0-46,7 % от первоначально добавленного, соответственно при спонтанном и направляемом брожениях.

Литература

  1. Chlorothalonil. In: JMPR Pesticide residues in food - 1997 evaluations. Part I - Residues. FAO Plant Production and Protection Paper 142,- 1998.- C. - 251-287.
  2. Cabras, P. Pesticide residues in grapes and wine in Italy / P. Cabras, E. Conte // Food Addit Contam,- v.18 - № 10.-2001. C. 880-885.
  3. PRC. Pesticides Residues Monitoring: Second Quarter Results April - June 2000: Summary Tables,- 2000. C. 11-18. Avialable at www.pesticides.gov.uk/committees/PRC/
  4. Soleas, G.J. Pesticide Residues in Unfennented Grape Juices and Raw Wines: A 5-year Survey of More than 3000 Products / G.J. Soleas, D.M. Goldberg // J. Wine Res- v. ll.-№3.-2000,-C. 197-207.
  5. Катерова, Л. Газовохроматографско определяне на фунгишщи в лозови листа, грозде, мъст и вино. I. Хлорталонил и фолпет / Л. Катерова // Сборник от научна конференция с международно участие, Плевен, 29-30 август 2007,- С. 242-248.
  6. Катерова, Л. Газовохроматографско определяне на фунгициди в лозови листа, грозде, мъст и вино II. Пропиконазол, пенконазол и миклобутанил / Л. Катерова // Сборник от научна конференция с международно участие, Плевен, 29-30 август 2007. С. 249-255.
  7. Катерова, Л. Остатьчни количества от хлорталонил, фолпет, пропиконазол, пенконазол и миклобутанил в грозде и лозови листа след последно третиране и при гроздобер / Л. Катерова // Лозарство и винарство. - Т. 56,- № 2,- 2007.- С. 20-27.
  8. Cabras, P. Persistence and metabolism of folpet in grapes and wine / P. Cabras, A. Angioni, V. Garau, M. Melis, F. Pirisi, G. Farris, C. Sotgiu, E. Minelli // J. Agric Food Chem. v.45.- №2,- 1997,-C. 476-479.
  9. Hatzidimitriou E. Hydrolyse du Folpel - Incidence sur le Declenchement de la Fermentation Alcoolique / E. Hatzidimitriou, Ph. Darriet, A. Bertrand, D. Dubourdieu // J. Int. Sci. Vigne Vin.- v. 31,- №1,- 1997. C. 51-55.
  10. Folpet (41). In: JMPR, Pesticide residues in food - 1998 evaluations. Part I - Residues. FAO Plant Production and Protection Paper, 152/1 and 152/2 1999 - C.639-693.
  11. Viviani-Nauer A. In vitro detection of folpet and its degradation to phthalimide in aqueous solutions and in yeast suspensions / A. Viviani-Nauer, P. Hoffmann-Boiler, J. Gafner // Am. J. Enol. Viticult. -v.48.- №1,- 1997,- C. 63-66.
  12. Иванов, Т. Практикум по винарска технология / Т. Иванов, С. Геров, А. Ян- ков, Г. Бамбалов, Т. Тончев, Д. Начков и М. Маринов - Пловдив: "Христо Г. Данов", 1979 - С. 51-53; 446-448 и 472.
  13. Viviani-Nauer A. In vivo detection of folpet and its metabolite phthalimide in grape, must and wine./ A. Viviani-Nauer, P. Hoffmann-Boiler, J. Gafner // Am. J. Enol. Viticult.- v.48.- №1,- 1997,- C. 67-70.
  14. Bugaret I. Des Precisions sur le Folpel /1. Bugaret // Phytoma def. veg. 446. - 1993 -C. 41-46.
  15. Larue F. Incidence de certains polysaccharides insolubles sur la fermentation alcoolique / F. Larue, C. Geneix, M-K. Park, Y. Murakami, S. Lafon-Lafourcade, P. Ribereau- Gayon // Connaiss. Vigne Vin.- v.19.- №1,- 1985,- C. 41-52.

По материалам Международной научно-практической конференции "Научно-прикладные аспекты развития виноградарства и виноделия на современном этапе" - Новочеркасск, ВНИИВиВ им. Я.И. Потапенко, 2009

Метки: вино |
 
< Особенности необходимости классификации явлений роста и явлений развития   Отчет по биологической оценке препаратов фирмы БАСФ >
Искать по сайту:
или внутренним поиском:

Translator

Наверх