Вирусные заболевания плодовых растений являются хроническими и системными. Это значит, что однажды заболевшее дерево остается больным в течение всей своей жизни и все его органы инфекционны. Использование таких растений в качестве маточных при вегетативном размножении приводит к производству зараженного посадочного материала и способствует дальнейшему распространению вирусных болезней.
Системный характер вирусных инфекций сельскохозяйственных растений определил и методы борьбы с ними как профилактические, а не лечебные. Для вирусов плодовых задачи профилактики, с одной стороны, облегчаются тем, что переносчики подавляющего большинства известных вирусных заболеваний этих культур либо отсутствуют, либо малоэффективны. Поэтому безвирусные растения в условиях открытого грунта могут в течение многих лет, а иногда и всей жизни не заразиться вирусами.
С другой стороны, отсутствие фитосанитарного контроля при вегетативном размножении плодовых культур привело к тому, что в настоящее время основные промышленные сорта всех пород и вегетативные подвои яблони повсеместно заражены вирусами. Поэтому, прежде чем решать проблемы профилактики, необходимо получить и размножить безвирусные клоны.
В связи с этим начиная с 1967 г. одновременно с изучением состава, распространения, эпидемиологии вирусов, поражающих плодовые культуры, мы приступили к разработке мер борьбы с ними. Мы исходили из традиционных представлений о том, что основным в борьбе с вирусами плодовых культур являются санитарная селекция и производство свободного от вирусов посадочного материала. Методы, которые мы использовали при отборе исходных безвирусных клонов, также были общепринятыми — апробированными и утвержденными Европейскими симпозиумами по изучению вирусных заболеваний плодовых деревьев (1965— 1970 гг.).
Вскоре мы убедились, что из-за широкого распространения ряда вирусов на основных сортах и подвоях плодовых культур нам, несмотря на большой объем работ и существенные затраты, удалось отобрать лишь единичные безвирусные клоны, себестоимость которых ввиду их малочисленности излишне высока. Так возникла проблема повышения эффективности санитарной селекции плодовых культур в борьбе с вирусными и микоплазменными заболеваниями.
РАЗРАБОТКА БЫСТРЫХ МЕТОДОВ ТЕСТИРОВАНИЯ ПЛОДОВЫХ КУЛЬТУР НА ВИРУСНЫЕ И МИКОПЛАЗМЕННЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ
С 1970 г. МНИИСВиВ и Институтом фитопатологии в Ашерслебене (ГДР) велись исследования по усовершенствованию методов диагностики вирусных и микоплазменных заболеваний плодовых культур для практических целей. Работу проводили в двух направлениях. Во-первых, испытывались и совершенствовались предварительные методы диагностики, направленные на выявление наиболее массовых сокопереносимых и непереносимых соком вирусных инфекций. После испытания многих методов была разработана система, включающая серодиагностику, электронную микроскопию нитевидных вирусов яблони, тест на травянистых индикаторах, двойную прививку в теплице на латентный комплекс яблони и груши и тест косточковых пород в теплице на сеянцах персика, ранее разработанный С. Marenaud (1965).
Применение системы предварительных тестов позволяет в условиях Молдавии выявлять в течение месяца от 50 до 75% сорто- образцов, зараженных наиболее распространенными вирусными заболеваниями, и исключать их из дальнейшей проверки или передавать на термотерапию. На основное тестирование при этом поступал уже в значительной степени проверенный материал, что существенно увеличивало его эффективность и одновременно уменьшало себестоимость отобранных безвирусных клопов.
Вторым направлением работ стало сокращение продолжительности основного тестирования. На этом этапе ускорение диагностики достигнуто путем значительного увеличения инфекционной нагрузки на каждое растение-индикатор. Вместо традиционной двойной окулировки было предложено массированное заражение однолетних растений-индикаторов шестью глазками тестируемых деревьев, что позволило закончить проверку растений не за три— четыре, а за один—два года, а комбинирование двух индикаторов сократило площадь под питомником тестирования и уменьшило стоимость полученных отбором безвирусных клонов (Kegler, Werderewskaja, Biwol, 1977).
Разработанные методы представлены на обсуждение специалистов стран-членов СЭВ на двух совещаниях (Кишинев, 1975 г.; Ашерслебен, 1976 г.) и положены в основу «Рекомендаций по выращиванию безвирусного посадочного материала плодово-ягодных культур и винограда» (М., 1980).
Как оказалось, над проблемой разработки быстрых методов диагностики вирусов в те же годы работали вирусологи разных стран. Существенный прогресс достигнут английскими исследователями, которые на основе иммуноферментного анализа разработали ELlSA-тест для практической диагностики вирусов плодовых культур непосредственно в тканях древесных растений (Clark, Adains, Barbara, 1976). Этот метод в последующие годы отработан для прямой диагностики вирусов: некротической кольцевой пятнистости, хлоротической кольцевой пятнистости, основных НЕПО-вирусов, а также вирусов шарки, хлоротической пятнистости листьев яблони и бороздчатости древесины яблони (Clark, Adams, Barbara, 1976; Barbara, Clark, Thresh, Casper, 1978; Koenig, 1978; Flegg. Clark, 1979; Detienne. Deibos, Dunez, 1980; Fuchs, 1980; Casper, 1982; McMorran, Cameron, 1983; Hamdorf, 1983).
Заметные успехи в тот же период достигнуты на пути совершенствования методов иммуноэлектронной микроскопии вирусов для целей их диагностики. К настоящему времени они разработаны в основном для нитевидных вирусов: шарки и хлоротической пятнистости листьев яблони (Noel, Kerlan, Garnier, Dunez, 1978; Kerlan, Mille, Dunez, 1981; Калашян, Липартия, 1983) и успешно разрабатываются для некоторых ИЛАР- и НЕПО-вирусов (Kerlan, Mille, Dunez, 1982). Перечисленные методические разработки мы широко используем для дальнейшего совершенствования системы производства свободного от вирусов посадочного материала.
