УДК 634.1:573.6
ОЗДОРОВЛЕНИЕ И СЕЛЕКЦИЯ РАСТЕНИЙ IN VITRO, ВИРУСОЛОГИЧЕСКИЙ МОНИТОРИНГ НАСАЖДЕНИЙ
Л.Л. Бунцевич, Г.К. Киселева, Ю.А. Денисенко, A.M. Дьяконова Северо-Кавказский зональный НИИ садоводства и виноградарства, г. Краснодар
Показано, что применение биотехнологических методов в оздоровлении и селекции растений продуктивно и имеет перспективы развития.
В селекционной работе при гибридизации зачастую образуются щуплые семена или семена, в которых зародыш гибнет на ранних стадиях развития. В таких случаях для получения новых сортов и форм активно используется метод изолированных зародышей и метод культуры семян in vitro.
В условиях предэпифитотийного распространения некоторых вредоносных вирусов плодовых (PPV, ASPV, ASGV и др.) необходимость вирусологического мониторинга, разработка мер по искоренению вирусов и фитоплазм в садах, совершенствование методики оздоровления in vitro очевидны и актуальны.
Цель исследований - совершенствование биотехнологических приемов в размножении и селекции растений, совершенствование методов фитосанитарного мониторинга насаждений и оздоровления растений от патогенов вирусной и фитоплазменной этиологии.
Объектами совершенствования методик оздоровления и селекции in vitro послужили: 21 гибрид вишни и черешни, подвой для черешни Гизелла, земляника сорта Мармалада, клематис, виноград сортов Гранатовый и Сацимлер, 4 гибрида яблони.
Идентификация заболеваний проводилась биологическим тестированием и визуальным методом.
В работе использованы методики Т.Д. Вердеревской (1985), В.А. Высоцкого (1989), Дж. М. Данвелл (1989), Э Фукс, X. Кеглер (1987), A. Hill (1984).
Проведенные исследования показали, что сорта вишни проявляют неодинаковую способность к размножению в культуре in vitro, причем сортовые различия проявляются как на стадии введения в культуру, так и на стадии пролиферации. Это следует учитывать при оценке возможностей сортов к клональному микроразмножению. Наибольший коэффициент размножения отмечен у формы BCЛ-2, он составляет 1:30 микропобегов в месяц.
При культуре семян в качестве экспланта необходимо использовать неочищенные семена с неповрежденной семенной кожурой.
Метод культуры семян и зародышей в комбинации с клональным микроразмножением позволяет получить из одного семени несколько растений. У гибрида Молодежная х Сашенька коэффициент размножения составил 1:5 побегов в месяц.
Для отработки новых технологических режимов, модификации питательных сред и получения нового селекционного материала:

  1. введены в культуру и размножены методом клонального микроразмножения 14 гибридов вишни, а также подвой для черешни Гизелла;
  2. методом культуры стерильных семян и зародышей в сочетании с техникой микроразмножения культивируются проростки, полученные из гибридных семян черешни.

Усовершенствованы и модифицированы методики оздоровления и размножения in vitro земляники, винограда и клематиса с учетом их биологических особенностей. Эти объекты введены в культуру in vitro и успешно культивируются.
Исследование разнообъемной тары при адаптации микрорастений гибридов вишни и черешни показало, что лучший результат по количеству и параметрам роста и развития дает использование 400 мл сосудов.
Завершившие адаптацию гибридные микрорастения переданы в селекцентр для оценки и дальнейшего использования в селекционной работе.
Способом проведения биологической актуализованной диагностики вирусов и фитоплазм в плодовых растениях является окулировка и/или прививка биологических индикаторов в крону тестируемых растений.
С первого вегетационного сезона и в течение ряда лет по состоянию побегов-индикаторов констатируется фитосанитарный статус тестируемых растений.
Результат диагностики считается положительным (положительный тест), если на индикаторных побегах были выявлены специфические симптомы.
В результате проведения фитосанитарного мониторинга в ряде хозяйств края:

  1. выявлена пролиферация яблони, а также констатированы признаки заболеваний, вызываемых вирусами карликовости сливы (или хлоротической кольцевой пятнистости косточковых по отечественной систематике) - Prune dwarf virus (PDV), некротической кольцевой пятнистости косточковых - Prunus necrotic ring spots virus (PNRSV), ленточного узора сливы - Plum line pattern virus (PLPV), шарки сливы - Plum pox virus (PPV), фасциация побегов черешни вирусной этиологии, фасциация и другие признаки вирусных заболеваний розы;
  2. показано, что вирусные заболевания высоко вредоносны и являются лимитирующим фактором развития плодоводства и питомниководства;
  3. следует обеспечить строгий фитосанитарный контроль вновь закладываемых плодовых насаждений всех пород;

- выявленные очаги вирусных заболеваний должны быть локализованы и искоренены путем раскорчевки и сжигания инфицированных растений.
Сертификационными исследованиями (фитосанитарных, помологических, гистологических и биометрических) питомников ОПХ «Центральное» и ОПХ им. К.А. Тимирязева установлено, что посадочный материал, выращенный в этих хозяйствах и заявленный на сертификацию соответствует стандартам 1 сорта ОСТ 10205-97.
ВЫВОДЫ
Результаты исследований показывают, что применение биотехнологических методов в оздоровлении и селекции растений продуктивно и имеет перспективы развития, особенно учитывая усложняющуюся фитосанигарную ситуацию по распространению вирусов в плодовых насаждениях.