НЕСПЕЦИФИЧНЫЕ ВИРУСЫ, ИЗОЛИРОВАННЫЕ ИЗ ПЛОДОВЫХ, ПАТОГЕННОЕ ДЕЙСТВИЕ КОТОРЫХ НЕ УСТАНОВЛЕНО
В последние годы появились многочисленные сообщения о заражении плодовых деревьев вирусами, широко распространенными на травянистых культурных и сорных растениях. К таким вирусам, в первую очередь, относятся вирус табачной мозаики, вирус огуречной мозаики-1, вирус мозаики хеноподиевых, вирус некроза табака, вирус кустистой карликовости томатов и вирус кольцевой пятнистости гвоздики. Три первых вируса идентифицированы на плодовых деревьях в Молдавии.
ВИРУС ТАБАЧНОЙ МОЗАИКИ (ВТМ)
Криптограмма. R/l: 2/5:E/E:S/0
Вирус табачной мозаики — типичный представитель группы ТОБАМО-вирусов. Частицы вируса имеют форму жесткой палочки размером 300X18 нм (рис. 33 г), коэффициент седиментации 194S, температура инактивации 90°С, разведение 10-6, хороший антиген, специфические переносчики отсутствуют, легко передается механически, в связи с большой стойкостью и контагиозностью вируса возможно заражение через корни в почве, загрязненной остатками больных растений.
Поражаемые растения. 190 видов из 30 семейств.
Распространение и история изучения.
На плодовых вирус табачной мозаики впервые описали II. С. Kirkpatrick, R. С. Linder (1964), обнаружившие его в яблоне. Затем вирус изолирован из вишни (Gilmer, 1967), сливы (Schade, 1969) и вновь многократно из яблони и груши (Gilmer, Wilks, 1967; Opel, Kegler, Richter, 1968). R. M. Gilmer, J. M. Wilks детально исследовали распространение вируса табачной мозаики на сортах и сеянцах яблони, доказали передачу инфекции семенами, установили локализацию вируса в семенах.
Р и с. 33. Вирус табачной мозаики:
а— локальные симптомы на Ch. quinoa; б —симптомы на Nicotiana niegalosiplioii; в — некрозы на Р. liybrida; г— электронограмма ВТМ в капле ФВК (Х97000, фото К). А. Калатина)
R. M. Gilmer в Нью-Йорке исследовал сеянцы М. platycarpa, полученные от зараженных материнских растений, и обнаружил ВТМ в 45 сеянцах из 119 проверенных, что составило 38%. J. М. Wilks в Канаде проверил 232 сеянца и семени яблони, выделив ВТМ из 68. Из восьми исследованных сортов вирус был установлен в семи, при этом, если исключить полностью свободный от ВТМ сорт Мекинтош, в остальных семи сортах (182 сеянца) заражение составляло 37%, т. е. очень близко к данным R. М. Gilmer. ВТМ присутствовал только в тех сеянцах, материнские деревья которых были заражены этим вирусом (в опытах R. М. Gilmer клон Geneva M-IX и инфицированный клон Делишеса). Локализация вируса в семенах установлена путем удаления наружной и внутренней оболочек. При этом R. М. Gilmer установил ВТМ во внутренней оболочке, но не в семядолях и зародыше, a J. М. Wilks обнаружил вирус в трех из десяти проверенных эмбрионов и в пяти из десяти семенных оболочек. Титр в семенах был низким, но при прорастании возрастал. Кроме яблони вирус табачной мозаики выделен из сеянцев пяти клонов груши.
Изолирование вируса в опытах R. М. Gilmer и J. М. Wilks проводилось путем растирания исследуемых тканей в 2% никотин- основании и заражения Ch. quinoa, а в опытах J. Wilks также Ch. amaranticolor. Идентифицирован вирус биологически — по реакции травянистых растений и свойствам в сыром соке, и серологически — с использованием стандартных сывороток к ВТМ (Gilmer, Wilks, 1967).
Η. Opel, H. Kegler, J. Richter (1968) также изолировали ВТМ из яблони и груши, при этом они исследовали штаммовую принадлежность выделенных изолятов. В соответствии с биологическими особенностями и серологическими свойствами они определили два штамма: грушевый вирус табачной мозаики-1 и грушевый вирус табачной мозаики-2. Первый идентичен штамму ВТМ — dahlemense Уиттмана, а второй — обычному штамму вируса табачной мозаики.
Из восьми исследованных грушевых изолятов пять представлены обычным штаммом, а три — dahlemense; все яблоневые изоляты представляли обычный штамм. О значительном распространении вируса табачной мозаики на сливе сообщает С. Schade (1969), которая обнаружила его в большинстве изолятов вируса шарки.
Изолят вируса, выделенный из деревьев сливы, изучен биологически и серологически в сравнении с пятью другими штаммами вируса табачной мозаики и мозаики томатов: TMV-41, ToMV- L/DH, U2,C13 и Sd. На травянистых индикаторах установлено следующее отличие изолята из сливы: он вызвал системное поражение и деформацию листьев у Ch. murale и некроз стебля у N. glutinosa. Серологическое изучение с применением методов иммунодиффузии, микропреципитации и внутригелевой адсорбции позволило идентифицировать изолят из сливы как штамм TMV-41 (Burgyan, Beczner, Nemeth, 1980).
Вирус табачной мозаики выделен из черешни с симптомами крапчатости и деформации листьев. Одновременно изолирован другой, сферический вирус, предположительно из ΝΕΡΟ-группы. Ответственность ВТМ за описанные симптомы не установлена (Babovic, Perisic, Matijevic, 1980).
В Советском Союзе вирус табачной мозаики изолирован из плодов сливы с симптомами оспы и линейной мозаики и из персика, зараженного теми же вирусами (Pomaskov, Misina, 1968).
В Молдавской ССР вирус табачной мозаики изолирован из бутонов и молодых листьев вишни с симптомами преждевременного усыхания. Инокулюм готовился по методу Н. Opel, Н. Kegler (1968). Заражались растения Ch. quinoa в возрасте шести-восьми настоящих листьев. Из 47 образцов, перенесенных таким образом на Ch. quinoa, вирус табачной мозаики обнаружен в трех. Первичные поражения, вызванные им на натертых листьях, были малочисленными, после пассажа на Ch. quinoa и Nicotiana megalosiphon (рис. 33 а, б) концентрация вируса быстро возрастала.
На N. glulinosa вирус вызывал характерные некротические поражения, на Petunia hybrida (рис. 33 в) также давал местные некрозы на натертых листьях без системной мозаики, на Ch. quinoa — местные желто-оранжевые, позднее некротические пятна без системных симптомов, на N. megalosiphon вызывал некрозы на натертых листьях и системную мозаику, которая позже становилась некротической.
Свойства вируса изучались в соке N. megalosiphon, разведенном в фосфатном буфере рН-7. Температура инактивации равнялась 80—82°С, разведение 10-5, выстаивание — более 20 дней. Таким образом, вирус менее стоек, и концентрация его ниже, что характерно для обычного штамма этого вируса.
В препаратах, приготовленных методом негативного окрашивания, Ю. А. Калашян обнаружил типичные для ВТМ прямые жесткие палочки размером 300X17 нм (рис. 33 г). Вирус идентифицирован серологически капельным методом в соке N. megalosiphon сывороткой к обычному штамму ВТМ, предоставленной нам доктором И. Рихтером.
Методы, диагностики. Серологический и электронная микроскопия.
