Содержание материала

Выращивание саженцев из меристематической ткани верхушек побегов
Этот способ обеспечивает очень высокий коэффициент размножения. Сам процесс очень трудоемкий и, пока что, применяемый в НИУ для размножения новых дефицитных и интродуцированных сортов винограда и разработки новых методик.
В настоящее время проводятся исследования по выращиванию верхушек побегов после термотерапии (метод радикального лечения винограда от термолабильных вирусов); по клональному микроразмножению с использованием в качестве исходного материала меристематических верхушек (культура меристем); по культуре каллюсов для получения на этой основе соматических эмбрионов; по культуре микроспор и пыльников с целью получения гаплоидных и гомозиготных растений; по культуре изолированных протопластов и каллюсных клеток, полученных из перикарпия ягод; по сохранению и размножению ценных генотипов и др.
Практический выход в производство получил метод клонального микроразмножения с использованием в качестве исходного материала меристематических верхушек и целых почек (НИВиВ Республики Молдова), а также метод дробления верхушечной меристемы почек (ИВиВ “Магарач”). Раздробленную меристему в стерильных условиях (in „vitro”) помещают на определенную питательную среду, а формирующиеся на ней проростки затем помещают на твердую питательную среду в другие пробирки. В условиях термостата в пробирках развивается побег, состоящий из 8-10 междоузлий. Затем эти проростки черенкуют и высаживают в теплицы или в открытый грунт.
Способ суспензионной культуры клеток с использованием каллюса освоен в ИВиВ “Магарач”.
Значительный ущерб виноградникам наносят вирусные заболевания и бактериальный рак. Они вызывают вырождение и гибель кустов, снижают урожайность и качество продукции. Для получения безвирусного и безбактериального посадочного материала применяются разные способы его оздоровления с последующим размножением на питательных средах. В НИВиВ Республики Молдова разработана технология, при которой верхушки побегов с оздоровленных растений длиной 3-4 мм высаживают в пробирки с питательной средой в стиральных условиях (рис. 35).
После высадки верхушек в питательную среду пробирки покрывают фольгой, укупоривают пленкой парафина и помещают в культуральный бокс. Выращивание эксплантантов осуществляется при температуре воздуха 27°С, относительной влажности 80-85%, освещенности 1500-2000 лк/м2 при 16часовом световом дне.
На 10-й день после посадки появляются корешки и начинается рост верхушки. Для хорошего роста побегов и корешков растения пересаживают из узких пробирок в более широкие без нарушения асептики. Температура поддерживается на уровне 25-27°С, относительная влажность 60-70%, продолжительность светового дня - 16 ч., при освещенности 3-4 тыс. лк/ м2.
Через 1-1,5 месяца растения извлекают из пробирки пинцетом, промывают корни раствором перманганата калия и пересаживают в полиэтиленовые трубочки, заполненные перлитом, которые затем помещают в бокс с температурой 25-28°С, освещенностью в первые 3 недели 3 тыс. лк/м2, а затем - 10 тыс. лк/м2.
Влажность воздуха поддерживают на уровне 100%. При поливе вносят удобрения в виде раствора в стерильной воде.
Затем растения высаживают в теплицы, в предварительно стерилизованный в автоклаве, субстрат для выращивания саженцев. Выкопанные осенью саженцы тестируют, выделяя безвирусные экземпляры, которые затем высаживают на постоянное место.