Содержание материала

 Подобно другим микроорганизмам, фаги обладают антигенными свойствами, обусловленными, главным образом, белковыми компонентами фаговой частицы. Антигенные свойства являются важным тестом, характеризующим биологию фагов и степень их генетического родства.

Сведения об антигенных свойствах фагов молочнокислых бактерий весьма немногочисленны. Медвинская Л.Ю.[51], использовав серологический метод для определения чистоты двух типов фага, показала, что фаги, различающиеся по основным свойствам, были различны и серологически. Вильковский X. и соавт. [198] при попытке дать серологическую классификацию фагов молочнокислых стрептококков выделили 7 серологических групп. Изучение антигенных свойств фагов, выделенных из различных источников, даёт возможность установить родство между ними и судить об их происхождении [160, 181, 182, 153, 87, 57]. У дефектных фагов серологические характеристики особенно необходимы для выяснения происхождения [185].
В наших исследованиях при изучении антигенных свойств фагов имунные антифаговые сыворотки получали по схеме Щегловой [91], предложившей двукратное внутрибрюшинное введение депонированного антигена в объёме 30 см3. Депо антигена создавали путём адсорбции фага на смеси А1С13, Na3PO4. Для иммунизации использовали кроликов массой 2,5-3,0 кг. Интервал между первичной иммунизацией и реиммунизацией составлял 2 мес., что соответствует наибольшей иммунологической перестройке организма [36]. Антифаговые сыворотки использовались для изучения антигенных свойств фагов в реакции нейтрализации, которую ставили по методике Адамса [2]. Результаты выражали в виде константы скорости нейтрализации

где D - разведение сыворотки;
t - время в минутах;
Ро - количество фага в исходный момент времени;
Р - количество фага в момент времени [2].
Антигенные свойства трёх фагов Lact. planiarum изученные нами в реакции нейтрализации с гомо- и гетерологичными сыворотками, дали возможность установить степень их генетического родства. Полученные антифаговые сыворотки обладали высокой фагонейтрализующей способностью, вызывая 100%-ную нейтрализацию гомологических фагов в разведении 1:100 в течение 15 мин.
Результаты перекрёстной нейтрализации фагов антифаговыми сыворотками представлены в табл. 5.7.
Константа скорости нейтрализации фагов гомологичными сыворотками колебалась от 90,4 + 5,8 мин.-1 для фага Lp 7/6 до 155,97 + 2,44 мин.-1 и 163,06 + 3,22 мин.-1 для фагов Lp 16/28 и Lp 20/5 соответственно. Нейтрализация гетерологичными сыворотками заметно различалась у трёх штаммов фага. При этом наиболее ярко выделяется фаг Lp 7/6, у которого константа скорости нейтрализации гетерологичными сыворотками колебалась от 24,23 + 2,9 до 2,68 + 1,08 мин. Близкими по антигенному составу оказались фаги Lp 8020/5 и Lp 16/28, константы скорости нейтрализации каждого из них гетеросыворотками отличались мало.

Таблица 5.7
Антигенные свойства фагов Lact. plantarum

Таким образом, установлено наличие двух серологических типов фагов Lact. plantarum. К первому серотипу отнесены фаги Lp 20/5 и Lp 16/28, ко второму серотипу - фаг Lp 7/6. Сакурай Тошизо и соавт. (182) при изучении антигенных свойств фагов L. casei и L plantarum показали, что все 4 исследованных штамма L. plantarum составляли отдельный серологический тип.

Изучение оптимальной множественности инфекции фагов L. plantarum

Для осуществления фаголитического процесса чрезвычайно большое значение имеет оптимальная множественность инфекции, то есть соотношение фаговых частиц и бактериальных клеток. Для определения оптимальных условий фаголизиса молочнокислых бактерий вина нас интересовал некоторый диапазон значений pH, прежде всего величин pH, характерных для вина. Данных о возможной зависимости оптимальной множественности инфекции от pH среды в доступной нам литературе не обнаружено. Между тем вопрос этот имеет не только теоретический, но и практический интерес при подборе условий для получения эффективного лизиса в определенной системе фаг-бактерия.
Результаты определения оптимальной множественности инфекции для фагов L. plantarum (табл. 5.8) указывают на выраженную зависимость этого показателя от величины pH среды. Высокие и относительно постоянные величины оптимальной множественности инфекции наблюдались при низких значениях pH (3,0-3,2). С увеличением pH от 3,2 до 4,6 для фага Lp 20/5 и от 3,2 до 4,0 для фага Lp 7/6 оптимальная множественность падает до минимальных значений.
Дальнейшее понижение кислотности среды приводит к новому подъёму показателей оптимальной множественности, достигающем максимума при pH 5,6-6,0 и остающегося на одном уровне при дальнейшем повышении величины pH.
Таблица 5.8
Оптимальная множественность инфекции фагов Lact. plantarum при различных pH

Таким образом, максимальная активность изученных фагов находится в диапазоне pH от 4,0 до 5,6, превышающем значения pH, характерные для вина [28].